Τι είναι η βακτηριολογική έρευνα; Σύμφωνα με ποιο σχέδιο εκτελείται; Τι σημαίνει ασφάλεια σε αυτή την περίπτωση; Ποιοι είναι οι στόχοι και τα στάδια της βακτηριολογικής έρευνας;
Γενικές πληροφορίες
Η βακτηριολογική εξέταση είναι μια επιστημονική διαδικασία κατά την οποία εντοπίζονται βακτήρια και μελετώνται οι ιδιότητές τους προκειμένου να γίνει μικροβιολογική διάγνωση. Μεγάλη σημασία εδώ έχει ο προσδιορισμός του τύπου ή των ειδών του μικροοργανισμού που προκύπτει (υποδηλώνεται καθαρή καλλιέργεια). Αυτό συνοδεύεται από τη μελέτη των βιοχημικών και φυσιολογικών ιδιοτήτων των οργανισμών, καθώς και της τάσης για σχηματισμό τοξινών. Για τους σκοπούς αυτούς, χρησιμοποιούνται αντιδράσεις καθίζησης και συγκόλλησης. Εφαρμόζεται επίσης η μόλυνση εργαστηριακών ζώων με επακόλουθη ανίχνευση παθολογικών αλλαγών.
Εργασία με δοκιμαστικό υλικό
Ο αλγόριθμος βακτηριολογικής μελέτης προβλέπει την αυστηρή τήρηση ειδικών οδηγιών. Έτσι, το υλικό δοκιμής πρέπει να συλλέγεται σε αποστειρωμένα πιάτα υπό άσηπτες συνθήκες. Είναι επίσης απαραίτητο να φροντίσετεγια να διασφαλιστεί η παράδοση στο εργαστήριο το συντομότερο δυνατό. Η αποθήκευση των δειγμάτων σε ψυχρή κατάσταση είναι επιθυμητή. Η τεχνική της βακτηριολογικής έρευνας προβλέπει πολλές πιθανές καταστάσεις. Έτσι, ο τύπος του αντικειμένου, οι ιδιότητες του μικροοργανισμού και η φύση της νόσου συχνά καθιστούν απαραίτητη την ανάπτυξη μεμονωμένων οδηγιών για εργασία. Στην εργασία χρησιμοποιείται ένας μεγάλος αριθμός διαφορετικών μεθόδων. Ένα από τα πιο κοινά είναι η βακτηριοσκόπηση. Αλλά εάν τα βακτήρια δεν είναι σταθερά, τότε χρησιμοποιείται μια θρυμματισμένη ή κρεμασμένη σταγόνα. Πρέπει να σημειωθεί ότι οι δύο τελευταίες επιλογές χαρακτηρίζονται από αυξημένο επίπεδο μεταδοτικότητας.
Βακτηριοσκόπηση
Σε αυτήν την περίπτωση, χρησιμοποιούνται εγκεφαλικά επεισόδια. Για να τα δημιουργήσετε, πρέπει να διανείμετε μια σταγόνα του υγρού που μελετάται στην επιφάνεια μιας γυάλινης διαφάνειας. Το Zates πρέπει να το στεγνώσει. Αυτό γίνεται συχνά μετακινώντας το φάρμακο μέσα από φλόγα που λαμβάνεται από καυστήρα αερίου. Αν και οι ενώσεις στερέωσης μπορούν να χρησιμοποιηθούν εναλλακτικά. Για να υποδείξει ότι έχουν πραγματοποιηθεί προπαρασκευαστικές ενέργειες με αυτό το παρασκεύασμα, βάφεται. Ο σκοπός ενός τέτοιου χειρισμού είναι η ακρίβεια, η οποία είναι πολύ σημαντική όταν πραγματοποιείται μικροσκοπική και βακτηριολογική εξέταση. Σε τελική ανάλυση, εάν επαναχρησιμοποιήσετε το φάρμακο για άλλο σκοπό, λαμβάνετε χυλό, με το οποίο θα είναι πολύ δύσκολο να δουλέψετε αποτελεσματικά.
Γιατί η βακτηριοσκόπηση είναι τόσο δημοφιλής
Αλλά λόγω της διαθεσιμότητας αυτής της μεθόδου. Εάν διενεργηθεί βακτηριολογική μελέτη ενός φρέσκου παρασκευάσματος, τότε για να προσδιοριστεί το παθογόνομπορούν να χρησιμοποιηθούν μικροχημικές αντιδράσεις ή επιλεκτική χρώση διαφόρων δομικών τμημάτων του μικροοργανισμού. Ποιό είναι καλύτερο? Ένα πιο ακριβές αποτέλεσμα μπορεί να επιτευχθεί όταν εργάζεστε με ένα έγχρωμο παρασκεύασμα. Σε αυτή την περίπτωση, το υλικό δοκιμής εφαρμόζεται σε μια προπαρασκευασμένη γυάλινη πλάκα. Και φροντίστε να λεπτύνετε (και αν είναι δυνατόν ομοιόμορφο) στρώμα. Μετά από αυτό, πρέπει να περιμένετε έως ότου το φάρμακο στεγνώσει στον αέρα. Οι μικροοργανισμοί στη συνέχεια σταθεροποιούνται χρησιμοποιώντας μία από τις συμβατικές μεθόδους. Μετά από αυτό, το ψυχρό παρασκεύασμα υποβάλλεται σε χρώση με διαφορικό ή απλό χρώμα. Για αυτό, μπορούν να χρησιμοποιηθούν ξηρά και αυτοφυή παρασκευάσματα. Μετά από αυτό, μένει να κατευθύνονται οι υπεριώδεις ή μικρές μπλε ακτίνες στον τόπο συσσώρευσης των οργανισμών, γεγονός που κάνει ολόκληρο το μικρόβιο ή ορισμένα μέρη του σώματός του να λάμπει.
Πρακτική εφαρμογή της βακτηριοσκόπησης
Χρησιμοποιείται για τη διάγνωση μιας σειράς μολυσματικών ασθενειών. Τα πιο γνωστά από αυτά είναι η φυματίωση, η γονόρροια και ο υποτροπιάζων πυρετός. Επιπλέον, καταφεύγουν στην έρευνα προκειμένου να μελετήσουν ολόκληρο το σύμπλεγμα μικροχλωρίδας ενός οργάνου ή προϊόντος. Αλλά οι επικριτές συχνά επισημαίνουν τη σχετική αναξιοπιστία και ανακρίβεια αυτής της μεθόδου.
Καλλιέργειες και υποκαλλιέργειες βακτηριακών καλλιεργειών
Εκτελέστε τα χρησιμοποιώντας μια πιπέτα Παστέρ. Η διεξαγωγή βακτηριολογικής και κυτταρολογικής εξέτασης είναι συχνά δύσκολο να πραγματοποιηθεί χωρίς ενοφθαλμισμό και υποκαλλιέργεια κατά τη διάρκεια της ροής εργασίας. Όταν εργάζεστε με μια πιπέτα Παστέρ, η άκρη τηςκόψτε με τσιμπιδάκια. Το ίδιο το εργαλείο μεταφέρεται στη συνέχεια μέσα από τη φλόγα του καυστήρα και στη συνέχεια αφήνεται να κρυώσει. Παρεμπιπτόντως, τόσο υγρά όσο και στερεά θρεπτικά μέσα μπορούν να χρησιμοποιηθούν για σπορά. Η επιλογή επηρεάζεται από τους στόχους της βακτηριολογικής έρευνας που επιδιώκονται. Ταυτόχρονα, είναι απαραίτητο να τηρείτε τον αλγόριθμο εργασίας και τις προφυλάξεις ασφαλείας. Έτσι, όταν εργάζεστε με ένα υγρό θρεπτικό μέσο, είναι απαραίτητο να βεβαιωθείτε ότι δεν χύνεται και δεν βρέχει τις άκρες του φελλού και των δοκιμαστικών σωλήνων. Όταν η μελέτη πραγματοποιείται με συμπαγές υλικό, χρησιμοποιείται συχνά μια ειδική βελόνα για την είσοδο στην καλλιέργεια. Όταν γίνεται σπορά και επανασπορά, θα πρέπει να γίνονται κοντά στη φλόγα ενός καυστήρα αερίου. Για την καθαρότητα του πειράματος, ο δοκιμαστικός σωλήνας δεν πρέπει να παραμένει ανοιχτός για μεγάλο χρονικό διάστημα. Όσο για το εργαλείο με κουλτούρα: θα πρέπει να βεβαιωθείτε ότι δεν αγγίζει τίποτα. Επίσης, η τεχνική της βακτηριολογικής έρευνας προβλέπει την καύση των άκρων του δοκιμαστικού σωλήνα πριν από το κλείσιμο. Ένα τελικό προϊόν πρέπει να υπογράφεται αμέσως μετά την παραγωγή για να αποφευχθεί μελλοντική σύγχυση.
Αποτελεσματικότητα σποράς
Πιστεύεται ότι αυτή η μέθοδος επιτρέπει τη λήψη πιο ακριβών και αξιόπιστων δεδομένων κατά τη βακτηριολογική διάγνωση από την προηγουμένως θεωρούμενη βακτηριοσκόπηση. Σε αυτήν την περίπτωση, ο αλγόριθμος των ενεργειών είναι ο εξής:
- Αρχικά, μια καθαρή καλλιέργεια αλείφεται πάνω από την επιφάνεια του θρεπτικού μέσου, το οποίο χύνεται σε ένα τρυβλίο Petri.
- Η αρχική σπορά πρέπει να γίνεται σε συνθήκες ευνοϊκές για το είδοςμικροοργανισμοί.
- Μετά από μία ή δύο ημέρες, παρουσία ενός βέλτιστου περιβάλλοντος, όλες οι κατάλληλες αποικίες μετακινούνται εκεί όπου μπορούν να αναπτυχθούν στο μέγιστο. Αυτό τους απελευθερώνει, επομένως, από την εξωτερική μικροχλωρίδα.
Το τελικό αποτέλεσμα είναι μια καλλιέργεια ομοιογενών βακτηρίων που μπορεί να αναγνωριστεί.
Αγνές καλλιέργειες
Μα πώς φτιάχνονται; Για αυτό, χρησιμοποιούνται βιολογικές και μηχανικές μέθοδοι. Στην πρώτη περίπτωση, μεγάλο ρόλο παίζουν τα θρεπτικά μέσα, όπου υπάρχουν απαραίτητες ευνοϊκές συνθήκες για την ανάπτυξη μιας συγκεκριμένης καλλιέργειας. Μια προσέγγιση μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί όταν μολύνονται πειραματόζωα που είναι ευαίσθητα σε συγκεκριμένο τύπο βακτηρίων. Οι μηχανικές μέθοδοι βασίζονται στη χρήση αποστειρωμένου οργάνου, με το οποίο η καλλιέργεια τοποθετείται σε θρεπτικό υλικό που βρίσκεται στο πρώτο, δεύτερο και τρίτο τρυβλίο Petri. Στη συνέχεια, είναι απαραίτητο να περιμένετε έως ότου αναπτυχθούν μεμονωμένες αποικίες και μια καθαρή κουλτούρα θα ξεχωρίσει ήδη από αυτές. Τα βακτήρια μπορούν επίσης να αναπτυχθούν σε ειδικούς θερμοστάτες, όπου η θερμοκρασία διατηρείται σε ένα συγκεκριμένο επίπεδο (συνήθως περίπου 37 βαθμούς). Σε αυτή την περίπτωση, η διαδικασία συνεχίζεται για περίπου μία ημέρα. Όμως, ανάλογα με τον τύπο των μικροοργανισμών, μπορεί να καθιερωθούν και άλλοι όροι. Επίσης σημαντική είναι η παρουσία της απαιτούμενης συγκέντρωσης οξυγόνου. Για να το κάνετε αυτό, χρησιμοποιήστε διάφορες μεθόδους αερισμού. Μέχρι στιγμής, μιλούσαμε για την κατάσταση συνολικά και γενικά, αλλά τώρα ας εστιάσουμε την προσοχή μας σε ποιο είναι το σχήμα της βακτηριολογικής έρευνας.
Πρακτική
Συχνά χρησιμοποιείται ένα σύνολο μεθόδων για την ανίχνευση παθογόνων μικροοργανισμών στο σώμα ενός ασθενούς ή πιθανού φορέα. Τα υλικά και οι μέθοδοι που χρησιμοποιούνται εξαρτώνται από τους στόχους της ανάλυσης, καθώς και από τις συνθήκες του περιβάλλοντος στο οποίο εκτελείται η εργασία. Στην πράξη, τις περισσότερες φορές τα βακτήρια ανιχνεύονται μέσω αιμοκαλλιεργειών που λαμβάνονται από άτομο ή ζώο. Εάν οι τοπικές βλάβες είναι καλά καθορισμένες, τα παθογόνα μπορούν να αναζητηθούν σε προβληματικές περιοχές. Αυτό είναι χαρακτηριστικό για παθήσεις όπως η δυσεντερία, η γονόρροια, η διφθερίτιδα και μια σειρά από παρόμοια. Σε ιδιαίτερα σοβαρές περιπτώσεις, αυτή η διαδικασία χωρίζεται σε ξεχωριστά στάδια βακτηριολογικής εξέτασης (η οποία είναι τυπική για τον τυφοειδή πυρετό). Κάθε ένα από αυτά χρησιμοποιεί τις δικές του μεθόδους, οι οποίες στοχεύουν στην εύρεση της αιτίας της μόλυνσης. Ας ρίξουμε μια πιο προσεκτική ματιά στην κατάσταση με τον τυφοειδή πυρετό. Την πρώτη εβδομάδα της νόσου, ο πιο αξιόπιστος τρόπος για τη διάγνωση της νόσου είναι οι καλλιέργειες αίματος. Στο δεύτερο, μια ορολογική μελέτη θεωρείται ότι είναι τέτοια. Την τρίτη εβδομάδα εξετάζονται τα κόπρανα. Η τελευταία μέθοδος θεωρείται ότι είναι ο έλεγχος των ανάρρων.
Ταυτοποίηση μικροοργανισμού
Ξεκινά με τη διαδικασία της βαφής του. Στη συνέχεια εξετάζουν πώς το βακτήριο μπορεί να διασπάσει υδατάνθρακες, αμινοξέα κ.λπ. Επιπλέον, αυτή η διαδικασία μπορεί να συμπληρωθεί με τη μελέτη άλλων ιδιοτήτων που διαθέτει κάθε μεμονωμένο γένος ή είδος μικροοργανισμών. Ως παράδειγμα, θα πρέπει να δοθούν οι δυνατότητες διάλυσης ερυθροκυττάρων διαφόρων ζώων, η επίδραση στην πήξη του πλάσματος του αίματος και η διάλυση του θρόμβου.ινώδες και ούτω καθεξής. Όλα αυτά είναι τα διαφορετικά χαρακτηριστικά των μεμονωμένων εκπροσώπων του μικροκόσμου. Επίσης, η ορολογική ταυτοποίηση μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την τελική αναγνώριση (αλλά αυτό συνήθως αφορά παθογόνα βακτήρια που ανήκουν στην εντερική οικογένεια).
Συμπέρασμα
Θα πρέπει να σημειωθεί ότι ένας αριθμός μικροοργανισμών δεν μπορεί να αναγνωριστεί με τις μεθόδους που περιγράφονται στο άρθρο. Σε αυτή την περίπτωση, χρησιμοποιείται ευρέως η πρακτική της μόλυνσης των εργαστηριακών ζώων. Ο υπολογισμός γίνεται στο γεγονός ότι θα εμφανιστεί χαρακτηριστική τοξικότητα ή παθογένεια, η οποία δεν παρατηρείται σε τεχνητές συνθήκες. Η μόλυνση μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί ως μέθοδος για τη συσσώρευση παθογόνων μικροβίων. Και ήδη όταν συγκρίνονται τα χαρακτηριστικά της μελετημένης καλλιέργειας, που βρέθηκαν στη διαδικασία μελέτης βιολογικών, μορφολογικών, ορολογικών και βιοχημικών ιδιοτήτων, μπορούμε να πούμε ότι είναι γνωστό με τι είδους μικρόβια έχουμε να κάνουμε. Ταυτοποίηση σημαίνει ένδειξη του γένους, του είδους και του τύπου του βακτηρίου. Εάν ο υπό μελέτη μικροοργανισμός αποκλίνει σε ορισμένες ιδιότητες από το τυπικό χαρακτηριστικό του, τότε αυτό πρέπει να υποδεικνύεται. Ορισμένοι εμπειρογνώμονες πιστεύουν ότι σε τέτοιες περιπτώσεις θα είναι χρήσιμο να επαναπροσδιοριστούν με επικάλυψη όλων των μεθόδων και τεχνικών που χρησιμοποιούνται. Μερικές φορές η έρευνα μπορεί να πάει στο επόμενο επίπεδο, το οποίο απαιτεί μια πιο σοβαρή (και πιο δαπανηρή) προσέγγιση. Εάν ελήφθησαν αρνητικά αποτελέσματα, τότε αυτό δείχνει ότι το παρασκεύασμαμικροοργανισμοί απουσίαζαν ή δεν ήταν βιώσιμοι. Αλλά για την ακρίβεια της έρευνας, εάν υπάρχουν υποψίες για έναν αριθμό φορέων βακίλλων (δυσεντερία, διφθερίτιδα, τυφοειδής πυρετός), εμφανίζονται επαναλαμβανόμενοι έλεγχοι σε τέτοιες περιπτώσεις. Αυτό είναι απαραίτητο ώστε οι ειδικοί να έχουν μια ακριβή ιδέα για το τι πρέπει να αντιμετωπίσουν.
